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天津本生—DMEM(低糖)的注意事項(xiàng)和使用步驟

更新時(shí)間:2023-03-10    點(diǎn)擊次數(shù):3706

  天津本生—DMEM(低糖)的注意事項(xiàng)和使用步驟


  DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。

  與MEM比較增加了各種成分的用量,同時(shí)又分為高糖型(低于4500gm/L)和低糖型(低于1000mg/L)。

  DMEM低糖培養(yǎng)基用于養(yǎng)干細(xì)胞可防分化,DMEM高糖可養(yǎng)大多數(shù)哺乳動(dòng)物的細(xì)胞。

  注意事項(xiàng):

  1、培養(yǎng)及長(zhǎng)期放置,需要2-8℃避光保存,請(qǐng)勿低溫凍存。

  2、培養(yǎng)基中添加的L-谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定、易分解,長(zhǎng)期放置后使用若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)變慢可以在使用前加入適量的L-谷氨酰胺,來(lái)維持細(xì)胞正常代謝。

  3、含有NaHCO3的培養(yǎng)基開(kāi)瓶次數(shù)較多后培養(yǎng)基內(nèi)的CO2會(huì)逐漸溢出,PH值上升,培養(yǎng)基的顏色會(huì)偏紫色。

  培養(yǎng)基偏堿性會(huì)造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡,建議分裝成小瓶使用或用HEPES調(diào)整至正常PH范圍。

   DMEM(低糖)使用步驟:

  1、準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑:根據(jù)不同菌類(lèi)的用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

  2、校正PH值:將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線、加熱溶解、補(bǔ)充水分、測(cè)定酸堿度,常用PH6.8-8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。

  用1NNaOH和1NHCI調(diào)節(jié)PH值到適宜范圍內(nèi)。

  3、過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用DMEM低糖紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

  4、分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

  5、滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。

  一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽孢有較強(qiáng)的抗熱性,需經(jīng)高壓蒸氣滅菌才能達(dá)到滅菌的目的。

  根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。

  因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。

  而在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

   DMEM(低糖) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。


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